《敢死队》的故事背景设定在1937年的抗日战争初期。国军中校马烽临危受命，组建了一支名为“025敢死队”的特别行动小组，任务是在南京城内实施一系列秘密打击，以削弱日军的战力。他从即将被处决的罪犯中挑选了五名他认为具备特殊技能和意志坚定的成员：麻老五，曾是苏维埃政府军械部长；徐飞虎，前中情局特工；唐人杰，擅长偷盗与潜入；强大龙，拥有超凡的身体素质；朱大山，则以智慧见长。这支队伍在执行任务过程中，成功营救了两名援华的美国医生，并保护了他们所拍摄的南京大屠杀证据胶片。经过精心策划，敢死队终于刺杀了日军驻南京最高指挥官熊本连太郎，并成功夺回了象征中华尊严的传国玉玺。面对即将到来的浩劫，这支由不同背景和技能组合而成的队伍作出了一个惊人的决定：为报复在日寇铁蹄下遇难的三十万同胞，在日军召开重要会议时与敌人同归于尽。这不仅是对敌人的致命一击，也是他们对历史的一次庄严致敬。
